PCR實驗室

PCR實驗室

又叫基因擴增實驗室。PCR是聚合酶鏈式反應(Polymerase Chain Reaction)的簡稱。是一種分子生物學技術，用于放大特定的DN***段，可看作生物體外的特殊DNA復制。通過DNA基因追蹤系統(tǒng)，能迅速掌握患者體內(nèi)的病毒含量，其精確度高達納米級別，精確檢測乙肝病毒在患者體內(nèi)存在的數(shù)量、是否復制、是否傳染、傳染性有多強、是否必要服藥、肝功能有否異常改變能及時判斷病人最適合使用哪類抗病毒藥物、判斷藥物療效如何、給臨床治療提供了可靠的檢驗依據(jù)。

PCR實驗室技術要求

標準PCR實驗室建設--設計要點

主體結(jié)構(gòu)

目前實驗室的主體多為彩鋼板、鋁合金型材。室內(nèi)所有陰角、陽角均采用鋁合金R50內(nèi)圓角鋁，從而解決容易污染、積塵、不易清掃等問題。并且彩鋼板結(jié)構(gòu)牢固，線條簡明，美觀大方，密封性好。

標準四區(qū)分隔和氣壓調(diào)節(jié)

將PCR過程分成試劑準備、標本制備和PCR擴增區(qū)及產(chǎn)物分析檢測區(qū)四個獨立的試驗區(qū)。整個區(qū)域有一個整體緩沖走廊。每個獨立試驗區(qū)設置有緩沖區(qū)，同時各區(qū)通過氣壓調(diào)節(jié)，使整個PCR實驗過程中試劑和標本免受氣溶膠的污染并降低擴增產(chǎn)物對人員和環(huán)境的污染。

消毒

在四個實驗區(qū)和四個緩沖區(qū)頂部以及傳遞窗內(nèi)部安裝紫外線燈，供消毒用。在試劑準備區(qū)還設置移動紫外線燈對實驗桌進行局部消毒。

機械連鎖不銹鋼傳遞窗

試劑和標本通過機械連鎖不銹鋼（不建議使用電子連鎖方式）傳遞窗傳遞，保證試劑和標本在傳遞過程中不受污染（人物分流）。

地面

地面建議使用PVC卷材地面或自流平地面，整體性好。便于進行清掃，耐腐蝕。沒有條件的也可采用水磨石地面，或大塊的瓷磚（至少800mm*800mm）接縫需小于2mm。

PCR實驗室平面規(guī)劃圖

標準PCR實驗室建設--空氣流和壓差要求

▅ PCR實驗室的空氣流向必須嚴格按照試劑儲存和準備去→擴增區(qū)→擴增產(chǎn)物分析區(qū)空氣壓力逐漸遞減方式進行，防止擴增產(chǎn)物空氣氣流進入擴增前的區(qū)域。

▅ 空氣潔凈級別不同的的相鄰的房間之間中的靜壓差大于5帕，潔凈室（區(qū)）與室外大氣的靜壓差應大于10帕，應配備監(jiān)測靜壓的設備，并定期監(jiān)控。

標準PCR實驗室建設--潔凈裝修要求

▅ 潔凈室（區(qū)）的內(nèi)表面應平整光滑、無裂縫、借口嚴密、無顆粒物脫落，并能耐受清洗和消毒，墻壁與地面的交界處宜成弧形或采取其他措施，以減少灰塵積聚和便于清潔。

▅ 潔凈室（區(qū)）內(nèi)各種管道、燈具、風口以及其他公用設施，在設計和安裝時應考慮使用中避免出現(xiàn)不易清潔的部位。

▅ 潔凈室（區(qū)）的窗戶、天棚及進入室內(nèi)的管道、風口、燈具與墻壁或天棚的連接部位均應密封。

PCR實驗室基本由五大結(jié)構(gòu)組成，常見為：pcr走廊、準備區(qū)、制備區(qū)、擴增區(qū)和擴增分析區(qū)。

▅ 準備區(qū)

實驗所需試劑的準備工作，分裝等，由傳遞窗運送至制備區(qū)，嚴謹走人員通道。

▅ 制備區(qū)

主要進行樣品等保存，rna\dna的提取、貯存和其加入至擴增反應管和測定rna\dna的合成。

▅ 擴增區(qū)

dna的擴增，以制備的dna模版和合成的cDNA的加入和主板反應混合液制備成反應混合液等也可在擴增區(qū)內(nèi)進行，在巢式pcr測定中，通常在第一輪擴增后必須打開反應管，因此巢式擴增有較高等污染危害性，第二次加樣必須在本區(qū)完成。

▅ 擴增分析

主要用來做擴增產(chǎn)物的測定，本區(qū)是主要的擴增產(chǎn)物污染來源，因此必須主意避免通過本區(qū)的物品或者工作服將擴增產(chǎn)物帶出。